Konstrukty genetyczne FLAG-białko1 i Myc-białko2

Specjalistyczne forum biotechnologiczne. Metody biotechnologiczne: real-time PCR, western-blot, dot-blot, barwienie, chromatografia, dializa. Zakup, stosowanie odczynników: enzymy restrykcyjne, polimerazy DNA, drabinki i markery białkowe, kwasy nukleinowe, primery do sekwencjonowania, pożywki bakteryjne... Aparatura laboratoryjna, badawcza.
Ailatan1
Posty: 2
Rejestracja: 18 paź 2014, o 13:48

Konstrukty genetyczne FLAG-białko1 i Myc-białko2

Post autor: Ailatan1 »

Witam, mam pytanie posiadamy 2 konstrukty genetyczne FLAG-białko1 i Myc-białko2, zadanie polega na tym aby białko znakowane Myc zmienić w ten sposób aby było znaowane FLAGiem - FLAG-białko2. W jaki sposób to zrobić?
echtsein
Posty: 12
Rejestracja: 19 wrz 2011, o 14:07

Re: Pomoc

Post autor: echtsein »

Jeśli się da i są pasujące do tego miejsca restrykcyjne, to przeklonować fragment DNA kodujący białko2 do wektora FLAG-białko1 w miejsce białko1. Jeśli nie ma takich enzymów restrykcyjnych, to używając jakiejś polimerazy typu proofreading, zamplifikować fragment białko2, zrobić inverse PCR na plazmidzie zawierającym FLAG-tag i ustawić reakcję Gibson assembly z obydwoma fragmentami DNA.
ODPOWIEDZ
  • Podobne tematy
    Odpowiedzi
    Odsłony
    Ostatni post

Kto jest online

Użytkownicy przeglądający to forum: Obecnie na forum nie ma żadnego zarejestrowanego użytkownika i 1 gość