Analiza restrykcyjna - pomoc w zadaniu

Specjalistyczne forum biotechnologiczne. Metody biotechnologiczne: real-time PCR, western-blot, dot-blot, barwienie, chromatografia, dializa. Zakup, stosowanie odczynników: enzymy restrykcyjne, polimerazy DNA, drabinki i markery białkowe, kwasy nukleinowe, primery do sekwencjonowania, pożywki bakteryjne... Aparatura laboratoryjna, badawcza.
fluorescent92
Posty: 1
Rejestracja: 5 mar 2017, o 11:24

Analiza restrykcyjna - pomoc w zadaniu

Post autor: fluorescent92 »

Witam,
uprzejmie proszę o pomóc w rozwiązaniu zadania:

Zajmujesz się wirusem X, którego genomem jest dwuniciowy, kolisty DNA o wielkości 5,3 kpz.
Przeprowadzasz jego analizę restrykcyjną trzema enzymami: SspI, XhoI, SmaI.
Reakcje trawienia zostały rozdzielone na żelu razem z niestrawioną próbką DNA wirusa X (jako kontrolą). Uzyskany wzór prążków w załączniku (założono, że wszystkie reakcje zaszły).

a) zidentyfikuj prążki nieprzeciętego DNA (oznaczone jako A i B)
b) ile razy enzym XhoI tnie DNA wirusa X? Uzasadnij.
c) ile razy enzym SspI tnie DNA wirusa X? Uzasadnij.
d) Koleżanka stwierdza, że wirus X ma dwa miejsca cięcia dla SmaI, mimo że na żelu są 3 prążki. Zakładając, że ma ona rację - zaproponuj wyjaśnienie obecności 3 prążków na żelu i zidentyfikuj każdego z nich.
Załączniki
Bez tytułu.png
sebgen
Posty: 1
Rejestracja: 24 cze 2017, o 14:53

Re: Analiza restrykcyjna - pomoc w zadaniu

Post autor: sebgen »

a) A forma zrelaksowana OC B forma superskrecona CC
b) raz. Masz forme liniowa która migruje pośrednio między OC i CC
c) ani razu masz wzór dwóch firm niestrawionych jak w kontroli
d)koleżanka ma rację. Ale reakcja nie jest kompletna. Widzisz forme cięta tylko raz odpowiadającą formie liniowej i dwa produkty w przypadku pełnego podwójnego cięcia.
ODPOWIEDZ
  • Podobne tematy
    Odpowiedzi
    Odsłony
    Ostatni post

Kto jest online

Użytkownicy przeglądający to forum: Obecnie na forum nie ma żadnego zarejestrowanego użytkownika i 2 gości