Biolog.pl

Witam, potrzebna mi pomoc z pytaniem: Jak udowodnić/wykazać, że DNA ma introny i eksony?
Oczywiście wiem, że podczas splicingu z pre-mRNA wycinane są introny i otrzymujemy mRNA składający się wyłącznie z eksonów, ale jak np. mając konkretną sekwencję DNA jednego genu udowodnić, że zawiera w sobie fragmenty kodujące i niekodujące? Nie mam pojęcia jaką metodą można byłoby to zrobić

Mnie na szybko przyszło do głowy coś takiego:
Jeśli masz sekwencję DNA genu, to wiesz, ile jest tam nukleotydów i ile łańcuch polipeptydowy powinien mieć aminokwasów (liczba nukleotydów / 3) - ilość aminokwasów teoretyczna. Ilość rzeczywistą można wyznaczyć za pomocą np. degradacji Edmana (może jest lepsza metoda?), a następnie porównać z teoretyczną i jeśli jest różnica, to znaczy, że DNA zawierało fragmenty niekodujące.

Niestety nie uwzględnia to obróbki posttranslacyjnej łańcucha.

To było udowodnione bardzo prostym doświadczeniem, chyba z publikacji w latach 1975-1980 - wystarczyła hybrydyzacja mRNA z DNA, a później obserwacja pod mikroskopem elektronowym. W takim wypadku DNA tworzyło pętle tam gdzie były w jego strukturze introny - później to pocięto restryktazami, żeby sprawdzić długość odcinków i okazało się, że DNA jest dłuższe od RNA.